培養(yǎng)干細(xì)胞尤其iPSC有多種包被方法，例如用動(dòng)物來(lái)源的小鼠滋養(yǎng)層細(xì)胞、層粘連蛋白、Matrigel，人來(lái)源的基質(zhì)蛋白等，但是該類(lèi)生物來(lái)源物質(zhì)在擴(kuò)產(chǎn)及應(yīng)用上有一定的限制，其批間穩(wěn)定性會(huì)受生物體差異影響。那么有沒(méi)有更好的選擇呢？趕緊跟著小C一起來(lái)往下看吧。

Corning Synthemax 為無(wú)外源合成多肽共聚物，模擬細(xì)胞天然環(huán)境中胞外基質(zhì)的特性支持貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)，使用方法方便快捷，可以用水直接溶解進(jìn)行多種培養(yǎng)器皿表面包被，可在保證多能分化潛能的前提下支撐多功能干細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)，包括iPSC和ES等。

Synthemax表面可以在保障干細(xì)胞分化多能性的情況下，在無(wú)血清培養(yǎng)基中維持干細(xì)胞進(jìn)行20代以上的擴(kuò)增。

●穩(wěn)定的細(xì)胞倍增時(shí)間和細(xì)胞活力

●維持干細(xì)胞未分化狀態(tài)及細(xì)胞形態(tài)，例如marker Oct4, TRA-1-60, SSEA4的表達(dá)

●維持常規(guī)核型

●定向分化成特定組織類(lèi)型，例如心肌細(xì)胞。

●合成工藝，無(wú)外源添加，適用于GMP級(jí)別細(xì)胞生產(chǎn)工藝

●批間一致性好，可追溯

圖1 . 在四種培養(yǎng)方式中，iPSC（201B7） 細(xì)胞形態(tài)相近，第一種條件下細(xì)胞形態(tài)略微有一點(diǎn)不同，但在后續(xù)性能驗(yàn)證中無(wú)明顯差異。bar=100μm

圖2. 對(duì)人iPSC連續(xù)10代培養(yǎng)的倍增時(shí)間，每種條件下各代次進(jìn)行3次平行培養(yǎng)。四種培養(yǎng)條件下倍增時(shí)間接近，均可滿(mǎn)足人iPSC的培養(yǎng)

圖 3. 每種培養(yǎng)條件下iPSC未分化狀態(tài)Markers染色結(jié)果，bar=100μm。四種培養(yǎng)條件下iPSC未分化狀態(tài)標(biāo)志蛋白表達(dá)情況無(wú)明顯差異，均可滿(mǎn)足人iPSC的擴(kuò)增培養(yǎng)

圖 4.  四種培養(yǎng)條件下培養(yǎng)的人iPSC OCT4或者SSEA-4表達(dá)情況流式分析結(jié)果，四種條件相類(lèi)似無(wú)明顯差異

圖 5. 人iPSC在MEF上先培養(yǎng)然后進(jìn)行培養(yǎng)表面轉(zhuǎn)換后倍增時(shí)間對(duì)比結(jié)果。雖然在剛轉(zhuǎn)換時(shí)有微小差異，但在后續(xù)傳代中趨于一致。藍(lán)色線(xiàn)： MMEF直接轉(zhuǎn)換為Corning Synthemax；紅色線(xiàn)：MMEF 先轉(zhuǎn)換為Matrigel包被表面再轉(zhuǎn)換為Corning Synthemax包被表面

圖 6. 在第一種和第四種培養(yǎng)條件下的iPSC 進(jìn)行定向分化，形成具有收縮功能擬胚體的百分比分別為40%左右和30%左右。橙色為第一種培養(yǎng)組合Corning Synthemax + X Medium；綠色為第四種培養(yǎng)組合MEF Feeder Cells + E Medium。6次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)，480EBs/實(shí)驗(yàn)/培養(yǎng)條件

文章來(lái)源于康寧生命