小C講堂第36講——“挑戰(zhàn)性液體”如何進(jìn)行準(zhǔn)確移液
目前常見的移液器大多數(shù)基于氣體活塞原理，可適用于常規(guī)的移液操作。但當(dāng)遇到高粘度、易揮發(fā)性、高密度及非室溫狀態(tài)下的液體，該移液器移液結(jié)果的精度和準(zhǔn)確性可能會(huì)受到影響。針對(duì)這些具有挑戰(zhàn)性的特殊液體，選用外置活塞式移液器可較好的改善移液過程和精確度。液體通過外置活塞吸入和分配，無(wú)氣體活塞干擾，使得移液體積不會(huì)因樣品的物理特性（密度、粘度和揮發(fā)性等）而受到影響，確保分液體積的準(zhǔn)確性。
本期，小C將與大家一起分享，幾種挑戰(zhàn)性液體移液的案例分析，祝大家實(shí)驗(yàn)順利！
案例分析 示例：三氯甲烷 問題：移液體積小于預(yù)期值 分析：液體密度越高，單位體積的質(zhì)量越大，從而對(duì)液體和活塞之間的氣體施加越大的作用力，進(jìn)而增大氣體空間，導(dǎo)致吸取的液體量變小。 方案： 若使用氣體活塞式移液器，建議重新校準(zhǔn)。 推薦使用外置活塞式分液移液器。 示例：丙酮、乙腈 問題：吸頭掛有水滴或滴液 分析：液體揮發(fā)，吸頭內(nèi)部形成氣壓，迫使部分液體流出，導(dǎo)致吸頭掛液或滴液。預(yù)潤(rùn)吸頭將有助于吸頭中的空氣達(dá)到或更接近于平衡點(diǎn)的蒸汽壓力。 方案： 若使用氣體活塞式移液器，建議至少預(yù)潤(rùn)吸頭5次。 推薦使用外置活塞式分液移液器。 示例：甘油、Corning Matrigel? Matrix 問題：排液不準(zhǔn)確；移液體積減少 分析：粘性液體易粘附在吸頭表面，導(dǎo)致部分液體殘留在吸頭內(nèi)。同時(shí)，活塞與液體間的氣體空間越大（例如，使用1000μL吸頭吸取100μL液體），誤差越大。吸頭量程越大，越不適用于移取粘度高的液體。 方案 若使用氣體活塞式移液器，建議采用寬口的移液吸頭，反向移液，同時(shí)緩慢移液。 建議使用外置活塞式分液移液器。 示例：37°C的試劑和緩沖液；4°C或更低溫度的核酸樣品 問題：移液體積小于或大于預(yù)期值 分析：在移液過程中，當(dāng)液體溫度高于吸頭內(nèi)部空氣，氣體膨脹并將液體推出，從而使移取的液體體積少于預(yù)期。反之，會(huì)導(dǎo)致移取的液體多于預(yù)期值。 方案： 若使用氣體活塞式移液器，建議至少預(yù)潤(rùn)吸頭5次。 建議使用移液量程在或接近目標(biāo)移液體積的移液器，有助于提高精度。 文章來(lái)源于康寧生命科學(xué)